KREUZTESTS: WOZU DIENEN SIE, TECHNIK, BEGRÜNDUNG, PHASEN - MEDIZIN

Mit dem Crossmatch werden eine Reihe von Laborstudien durchgeführt, um festzustellen, ob Blutprodukte eines Spenders (hauptsächlich Vollblut und kugelförmig verpackt) mit dem Blut des Empfängers kompatibel sind.

Es ist ein zusätzlicher ergänzender Test zur ABO-Kompatibilität und zum Rh-Faktor. Der Grund für Crossmatching ist, dass manchmal zwei Personen (Spender-Empfänger) dieselbe ABO- und Rh-Gruppe haben, ihr Blut jedoch immer noch nicht kompatibel ist.

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Eine solche Inkompatibilität ist auf das Vorhandensein von Antikörpern gegen eine Reihe von Proteinen roter Blutkörperchen zurückzuführen, die als geringfügige Antigene bekannt sind. Diese Antigene werden nicht routinemäßig getestet, da sie auf Blutgruppe (ABO) und Rh-Faktor sind.

Dies liegt daran, dass die Nebenantigene viel seltener sind und in jedem Individuum eine variable Expression aufweisen. Daher ist es praktisch unmöglich, sie in Kategorien zu gruppieren, wie dies bei der Gruppe und dem Rh-Faktor der Fall ist.

Stattdessen werden rote Blutkörperchen des Spenders mit Patientenserum (Haupt-Match-Test) und rote Blutkörperchen des Patienten mit Spender-Serum (Neben-Match-Test) gemischt, um das Vorhandensein von Antigen-Antikörper-Reaktionen festzustellen.

Wenn Antikörper gegen geringfügige Antigene entweder im Patienten- oder im Spenderserum vorhanden sind, wird der Test als positiv bezeichnet, sodass in den meisten Fällen diese bestimmte Bluteinheit nicht transfundiert werden kann.

ABO Group

Um vollständig zu verstehen, worum es bei Kreuzreaktionen geht, müssen Sie zunächst die Grundlagen der Blutgruppen kennen.

In diesem Sinne ist es am wichtigsten zu wissen, dass Blut in vier Gruppen eingeteilt werden kann: A, B, AB und O.

Jede dieser Gruppen exprimiert ein bestimmtes Protein (Antigen) auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen, das von den Antikörpern eines potenziellen Rezeptors einer anderen Gruppe als Fremdelement identifiziert wird.

Das Auffälligste an Antigen-Antikörper-Reaktionen beim Blutabgleich ist, dass keine vorherige Exposition gegenüber dem Antigen erforderlich ist, damit Antikörper existieren. Dies ist als natürliche Antikörper bekannt.

Natürliche Antikörper

Im Allgemeinen ist es für das Vorhandensein von Antikörpern im Körper eines Individuums erforderlich, dass die weißen Blutkörperchen des Individuums zuvor dem Antigen ausgesetzt waren.

Dies bedeutet, dass beim ersten Kontakt zwischen dem Fremdantigen und dem Organismus keine Antikörper vorhanden sind, da diese später nach dem ersten Kontakt erzeugt werden. Daher ist es für das Immunsystem unmöglich, Antikörper gegen beispielsweise ein bestimmtes Virus zu haben, wenn es in der Vergangenheit nicht exponiert wurde.

Die einzige Ausnahme bilden Anti-AB-Antigene. In diesen Fällen hat die Person Antikörper gegen das Antigen, die ihre roten Blutkörperchen nicht haben, obwohl sie noch nie mit den roten Blutkörperchen einer anderen Person in Kontakt gekommen sind. Dies ist als natürliche Antikörper bekannt.

Antigene und Antikörper im Zusammenhang mit der Blutgruppe

Blutgruppen werden im Fall des ABO-Systems durch das Vorhandensein spezifischer Antigene (A oder B) auf der Membran der roten Blutkörperchen und im Gegensatz dazu Antikörper gegen das fehlende Antigen auf der Erythrozytenmembran bestimmt.

Somit exprimiert eine Person mit Blutgruppe A Antigen A auf der Oberfläche ihrer roten Blutkörperchen, während sich im Serum Anti-B-Antikörper befinden.

Im Gegensatz dazu wird bei Patienten der Gruppe B das B-Antigen gefunden, während die Antikörper Anti-A sind.

Patienten mit AB-Blut haben jedoch sowohl A- als auch B-Antigene. Daher gibt es keine Antikörper, da dies die roten Blutkörperchen dieser Person zerstören würde.

Das Gegenteil tritt in Gruppe O auf, wo die Erythrozytenmembran keines der beiden Antigene (weder A noch B) präsentiert, während im Serum Anti-A- und Anti-B-Antikörper vorhanden sind.

Inkompatibilität der ABO-Gruppe

Aus dem Obigen kann die Kompatibilität von ABO-Blutgruppen leicht abgeleitet werden, da die Kenntnis des Antigens der Erythrozytenmembran automatisch die Antikörper im Serum kennt. Damit:

- Blut A ist kompatibel mit Gruppe A und Gruppe O.

- Blutgruppe B ist kompatibel mit Blut B und O.

- Menschen mit Gruppe O können nur O-Blut erhalten (da sie Anti-A- und Anti-B-Antikörper haben), obwohl ihr Blut von allen anderen Gruppen problemlos aufgenommen wird, da es keine Antigene enthält.

- Endlich. Diejenigen, die Blutgruppe AB haben, können Blut von allen anderen Gruppen (A, B, O und natürlich AB) erhalten, da sie keine Antikörper gegen eines der Antigene haben. Allerdings können nur Personen der Gruppe AB AB-Blut erhalten, da alle anderen Gruppen Antikörper haben, die diese roten Blutkörperchen zerstören würden.

Kleinere Antigene

Wie bei ABO-Gruppen kann eine Reihe von Proteinen auf der Oberfläche von Erythrozyten gefunden werden, die wie Antigene der ABO-Gruppe als Antigene fungieren.

Diese Antigene sind jedoch nicht bei allen Individuen vorhanden. Ihre Kombination ist heterogen und die Penetranz (Grad der Proteinexpression) ist variabel, daher ist eine Einteilung in Gruppen wie die für ABO und Rh unmöglich. Daher leitet es seinen Namen von "kleinen Antigenen" ab, die auch als "Antigene mit geringer Inzidenz" bekannt sind.

Obwohl sie nicht häufig sind, kann es natürliche Antikörper gegen kleinere Antigene geben. Unter ihnen sind Lewis, MNSs, Anti-N, Kell, Duffy, Anti-Fyb und Kidd am häufigsten. Alle von ihnen sind für sehr schwerwiegende hämolytische Reaktionen und Reaktionen nach der Transfusion verantwortlich.

Zusätzlich kann es zu einer Sensibilisierung gegen geringfügige Antigene durch vorherigen Kontakt kommen, entweder mit den antigenen Proteinen aufgrund früherer Transfusionen oder aufgrund einer Kreuzimmunität.

Kreuzimmunität

Es wird gesagt, dass es eine Kreuzimmunität gibt, wenn zwei Antigene aus zwei verschiedenen Quellen (zum Beispiel einem roten Blutkörperchen und einem Bakterium) sehr ähnlich sind, bis zu dem Punkt, dass die Antikörper gegen eines dieser antigenen Proteine auch mit dem anderen reagieren, weil sie nahezu identisch sind .

Um dies besser zu verstehen, nehmen Sie das vorherige hypothetische Beispiel (Antigene aus roten Blutkörperchen und einem Bakterium). In keinem Fall gibt es natürliche Antikörper, aber wenn eine Person den Bakterien ausgesetzt ist, erzeugt sie Antikörper dagegen.

Solche Antikörper reagieren später gegen rote Blutkörperchen, wenn ihre Antigene denen der Bakterien sehr ähnlich sind, die die Bildung der Antikörper induziert haben.

In diesem Fall können die roten Blutkörperchen mit diesem bestimmten antigenen Protein nicht an die Person abgegeben werden, die die Antikörper besitzt, da dies zu einer Abstoßung führen würde. Hierin liegt die Bedeutung von Kreuzreaktionen.

Wofür ist Crossmatching?

Da es unmöglich ist, das Blut verschiedener Personen anhand der Nebenantigene zu gruppieren, kann nur durch Crossmatching festgestellt werden, ob im Blut einer Person Antikörper gegen die Nebenantigene der roten Blutkörperchen einer anderen Person vorhanden sind. .

In den Fällen, in denen Antikörper vorhanden sind, wird eine Hämolyse- oder Agglutinationsreaktion ausgelöst, weshalb der Schluss gezogen wird, dass die Reaktion positiv war. Das heißt, es gibt Antikörper gegen kleinere Antigene (obwohl nicht genau bekannt ist, welches). Ansonsten ist der Test negativ.

Basis

Crossmatches basieren auf der Antigen-Antikörper-Reaktion. Daher ist es mit ihnen möglich festzustellen, ob im Serum eines Empfängers Antikörper gegen die Antigene der roten Blutkörperchen des Spenders vorhanden sind (oder umgekehrt), was eine Antigen-Antikörper-Reaktion induziert.

Wenn keine Antikörper vorhanden sind, tritt keine Reaktion auf und der Test wird als negativ gemeldet. Im Gegenteil, wenn die Reaktion positiv ist (es gibt eine Hämolyse oder Agglutination während des Tests), kann geschlossen werden, dass die Antikörper vorhanden sind.

In diesem Zusammenhang ist zu beachten, dass sowohl im Spender- als auch im Empfängerserum Antikörper gegen rote Blutkörperchen vorhanden sein können. Aus diesem Grund gibt es zwei Arten von Kreuzreaktionen.

Arten von Kreuzreaktionen

Im Serum des Patienten können Antikörper gegen Spendererythrozyten vorhanden sein. Es kann aber auch das Gegenteil auftreten, dh Antikörper im Spender-Serum gegen die roten Blutkörperchen des Patienten.

Deshalb gibt es zwei Arten von Crossmatch:

- Major Crossmatch.

- Geringes Crossmatch.

Beide Typen werden routinemäßig in der Blutbank durchgeführt, bevor Blutprodukte transfundiert werden, da bei positiven Tests ein hohes Risiko für Transfusionsreaktionen besteht, die das Leben des Patienten gefährden können.

Major Crossmatch

Dieser Test bewertet, ob das Serum des Empfängers Antikörper gegen die roten Blutkörperchen des Spenders enthält.

In diesem Fall können keine Blutprodukte verabreicht werden, da eine große Menge an Antikörpern im Plasma des Patienten die roten Blutkörperchen des Spenders sehr schnell zerstört und dabei katastrophale Reaktionen im Körper des Empfängers hervorruft. Diese Reaktionen sind so schwerwiegend, dass sie lebensbedrohlich sein können.

Kleinere Crossmatch

In diesem Fall wird festgestellt, ob sich im Serum des Spenders Antikörper gegen die roten Blutkörperchen des Empfängers befinden.

In diesem Fall beginnen die Antikörper, die Erythrozyten des Empfängers zu zerstören. Da jedoch die Menge an Antikörpern begrenzt ist, ist die Reaktion weniger intensiv; obwohl es immer noch gefährlich ist.

Phasen

Sowohl das Haupt- als auch das Neben-Crossmatch sind in drei Phasen unterteilt:

- Kochsalzlösung.

- Thermisch oder Inkubation.

- Coombs.

In der ersten Phase werden die roten Blutkörperchen und das Serum in Kochsalzlösung gemischt. Anschließend wird Albumin zugegeben und die Probe 30 Minuten bei 37 ° C inkubiert, um schließlich mit der Coombs-Phase fortzufahren.

Technik

Die Crossmatch-Technik ist relativ einfach, da dem Patientenserum rote Blutkörperchen des Spenders (Haupt-Crossmatch) sowie Erythrozyten des Empfängers dem Spender-Serum (Neben-Crossmatch) hinzugefügt werden.

Um die Antigen-Antikörper-Reaktion in relativ kurzer Zeit zu induzieren, müssen eine Reihe standardisierter Schritte befolgt werden. Diese Schritte werden im Folgenden vereinfacht zusammengefasst.

Es ist wichtig zu beachten, dass im nächsten Abschnitt der Hauptverträglichkeitstest beschrieben wird, obwohl die Schritte für den Nebenverträglichkeitstest gleich sind, jedoch die Herkunft der roten Blutkörperchen und des Serums ausgetauscht werden.

Salzphase

- In ein Reagenzglas 2 Tropfen Serum vom Empfänger geben (vom Spender, wenn es sich um eine geringfügige Kreuzübereinstimmung handelt).

- Nehmen Sie dem Spender eine Probe roter Blutkörperchen (vom Empfänger, wenn es sich um eine geringfügige Kreuzübereinstimmung handelt).

- Die roten Blutkörperchen waschen und zentrifugieren.

- In einer Lösung zwischen 3% und 5% resuspendieren.

- Geben Sie einen Tropfen dieser Lösung in das Röhrchen mit dem Serum des Empfängers.

- Vorsichtig mischen.

- Zentrifuge.

- Lesen Sie das Ergebnis in der Anzeigelampe ab.

Thermische Phase

- 2 Tropfen 22% iges Albumin in das Röhrchen geben, in dem die Salzphase abgeschlossen war.

- 30 Minuten bei 37 ° C inkubieren.

- 15 Sekunden zentrifugieren.

- Lesen Sie das Ergebnis in der Anzeigelampe ab.

Coombs Phase

- Nehmen Sie die Zellen aus dem Röhrchen und waschen Sie sie mit Kochsalzlösung.

- Beseitigen Sie den Überstand.

- Fügen Sie zwei Tropfen Coombs-Reagenz hinzu.