MACCONKEY-AGAR: BEGRÜNDUNG, VORBEREITUNG UND VERWENDUNG - BIOLOGIE - 2025

Der MacConkey-Agar ist ein festes Medium, das die ausschließliche Isolierung von gramnegativen Bakterien ermöglicht. Aus diesem Grund ist es ein selektives Medium und ermöglicht auch die Unterscheidung zwischen laktosefermentierenden und nicht fermentierenden Bazillen, was es zu einem Differenzmedium macht. Es ist eines der am häufigsten verwendeten Kulturmedien in einem mikrobiologischen Labor.

Dieses Medium wird hauptsächlich zur Isolierung von gramnegativen Bazillen der Familie der Enterobacteriaceae verwendet, einschließlich opportunistischer und enteropathogener Arten.

MacConkey-Agar, der mit zwei Arten von Bakterien besät ist. Laktosefermentierende Kolonien auf der linken Seite, nicht laktosefermentierende Kolonien auf der rechten Seite.

Es kann auch verwendet werden, um andere enterische Bazillen zu isolieren, die im Magen-Darm-Trakt leben, aber nicht zu Enterobacteriaceae gehören, wie beispielsweise Aeromonas sp, Plesiomonas sp.

Schließlich kann es andere nicht glukosefermentierende gramnegative Bazillen isolieren, die in der Umwelt, im Wasser oder im Boden vorkommen, aber manchmal auch opportunistische Krankheitserreger wie Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum und Stenotrophomonas maltophilia sein können.

Basis

MacConkey-Agar

Die Grundlage dieses Mediums kann durch die Beschreibung seiner Komponenten erklärt werden, da jedes einen Zweck hat, der eine Eigenschaft davon bestimmt.

Gallensalze und Kristallviolett

In diesem Sinne hat MacConkey-Agar eine komplexe Zusammensetzung. Zuallererst enthält es Gallensalze und Kristallviolett.

Diese Elemente sind für die Hemmung des Wachstums von grampositiven Bakterien und einigen anspruchsvollen gramnegativen Bazillen verantwortlich. Dies begünstigt wiederum die Entwicklung von gramnegativen Bazillen, die von diesen Substanzen nicht betroffen sind. Daher ist es ein selektives Medium.

Es soll im Vergleich zu anderen Medien, die ebenfalls das Wachstum von grampositiven Bakterien und auch den meisten gramnegativen Bakterien hemmen, leicht selektiv sein.

Peptonen, Polypektone und Laktose

Es enthält Substanzen, die den in dieser Umgebung entstehenden Mikroorganismen die notwendigen Nährstoffe liefern, wie Peptonen, Polypektone und Laktose.

Laktose ist der Schlüsselpunkt für das Medium als Differenzmedium, da Mikroorganismen, die Laktose fermentieren können, stark rosa Kolonien entwickeln.

Einige Bakterien können Laktose langsam oder schwach fermentieren, blassrosa Kolonien entwickeln und laktosepositiv bleiben.

Diejenigen, die keine Laktose fermentieren, verwenden Peptonen als Energiequelle, produzieren Ammoniak und alkalisieren das Medium. Aus diesem Grund sind die Ursprungskolonien farblos oder transparent.

PH-Anzeige

Die Farbänderung wird durch eine andere essentielle Verbindung erreicht, die MacConkey-Agar enthält. Diese Verbindung ist der pH-Indikator, der in diesem Fall neutralrot ist.

Bei der Fermentation von Laktose entstehen gemischte Säuren. Sie säuern das Medium auf einen pH-Wert unter 6,8 an.

Dies führt dazu, dass sich der pH-Indikator in einen tiefrosa Farbton verwandelt. Die Intensität der Farbe kann abhängig vom endgültigen pH-Wert variieren.

Destilliertes Wasser, Natriumchlorid und Agar

Andererseits enthält es destilliertes Wasser und Natriumchlorid, die dem Medium Hydratation und osmotisches Gleichgewicht verleihen. Schließlich enthält das Medium Agar, die die Basis darstellt, die die Konsistenz des festen Mediums liefert.

Das hergestellte MacConkey-Agarmedium sollte einen endgültigen pH-Wert haben, der auf 7,1 ± 0,2 eingestellt ist.

Vorbereitung

Für einen Liter MacConkey-Agar müssen 50 g des dehydrierten Mediums gewogen, dann in einen Kolben gegeben und in einem Liter destilliertem Wasser gelöst werden. Nach 10 Minuten Stehenlassen wird es erhitzt und ständig gemischt, bis es 1 Minute lang kocht.

Der Kolben wird dann in den Autoklaven gestellt und 20 Minuten bei 121 ° C sterilisiert. Am Ende der Zeit wird es aus dem Autoklaven genommen und bis zum Erreichen einer Temperatur von 45 ° C abkühlen gelassen, um später in sterilen Petrischalen in einer Laminar-Flow-Haube oder vor dem Bunsenbrenner serviert zu werden.

Erstarren lassen und in einem umgekehrten Plattenhalter aufbewahren und bis zur Verwendung im Kühlschrank bei 2-8 ° C kühlen.

Um einen MacConkey-Agar zu erhalten, der den von der Gattung Proteus erzeugten Swarning-Effekt hemmt, wird ein salzarmer MacConkey-Agar verwendet.

Verwendung von herkömmlichem MacConkey-Agar

MacConkey-Agar ist in allen Kulturmedien enthalten, die für die Aussaat von im Labor erhaltenen klinischen Proben vorgesehen sind. Es ist auch nützlich in der Lebensmittelmikrobiologie und Umweltmikrobiologie.

Die Vielzahl der in diesem Medium wachsenden gramnegativen Stäbchen drückt phänotypische Merkmale aus, die dazu beitragen, eine vermutete Diagnose der betreffenden Art zu stellen. Zum Beispiel sind die Größe, Farbe, Konsistenz und der Geruch der Kolonien einige der Merkmale, die als Richtschnur dienen können.

In diesem Medium produzieren die Arten Escherichia coli, Klebsiella sp und Enterobacter sp stark rosa Kolonien, die von einer Zone ausgefällter Galle umgeben sind.

Während Bakterien wie Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp und Hafnia sp nach 24 Stunden farblos oder in 24 bis 48 Stunden blassrosa erscheinen können.

Ebenso produzieren die Gattungen Proteus, Edwadsiella, Salmonella und Shigella farblose oder transparente Kolonien.

Andere Varianten von MacConkey-Agar

Es gibt andere Varianten von MacConkey Agar, die bestimmte Zwecke haben. Sie werden unten erwähnt:

MacConkey-Agar mit Sorbit

Dieses Medium wurde entwickelt, um den enteropathogenen Stamm (enterohämorrhagisches Escherichia coli O157: H7) von den übrigen Escherichia coli-Stämmen zu unterscheiden.

Dieses Medium tauscht die Kohlenhydratlactose gegen Sorbit aus. Die enterohämorrhagischen E. coli-Stämme O157: H7 unterscheiden sich vom Rest, weil sie kein Sorbit fermentieren und daher transparente Kolonien erhalten werden, während der Rest der E. coli-Stämme Sorbit fermentiert und die Kolonien stark rosa sind.

MacConkey-Agar ohne Kristallviolett oder Salz

Dieser Agar unterscheidet sich stark vom klassischen MacConkey-Agar, da er keinen violetten Kristall aufweist und grampositive Bakterien wachsen können.

Andererseits hemmt die Abwesenheit von Salz das Auftreten von Schwärmen auf dem Agar, der von einigen enterischen Bazillen, wie denen der Gattung Proteus, produziert wird, und erleichtert somit die Isolierung aller vorhandenen Bakterien, einschließlich grampositiver Bakterien.

MacConkey-Agar mit Cefoperazon

Diese MacConkey-Agar-Variante wurde entwickelt, um zunächst Laribacter hongkongensis zu isolieren, und wurde später als nützlich für die Isolierung von Arcobacter butzleri befunden. Beide sind leicht gebogene gramnegative Stäbchen, die gegen Cefoperazon resistent sind.

Diese Bakterien wurden kürzlich in Verbindung gebracht, um Gastroenteritis und erworbenen Durchfall bei asiatischen und europäischen Personen zu verursachen, die als zwei starke neu auftretende Krankheitserreger auftreten.

Das Antibiotikum ermöglicht es, die begleitende Flora des Magen-Darm-Trakts zu hemmen, was die Entwicklung dieser Bakterien begünstigt und verhindert, dass sie unbemerkt bleiben, da sie 72 Stunden zum Wachstum benötigen.

MacConkey-Agar, hergestellt mit Meerwasser mit 10% v / v

Diese Variante ist nützlich für die Bewertung von bakteriellen Hygieneindikatoren für die Verunreinigung des Stuhls, einschließlich der Gesamtzahl der Coliformen und Fäkalkoliformen in salzhaltigen Freizeitgewässern (Strände und Buchten).

Cortez et al. Haben 2013 gezeigt, dass das auf diese Weise hergestellte Medium die Rückgewinnung dieser Mikroorganismen in der Salzumgebung im Vergleich zur Verwendung von mit destilliertem Wasser hergestelltem MacConkey-Agar signifikant erhöht.

Dies ist auf die Tatsache zurückzuführen, dass das modifizierte Medium das Wachstum von Bakterien stimuliert, die sich physiologisch in einem Latenzzustand befinden, der "lebensfähig, aber nicht kultivierbar" ist, weshalb sie in herkömmlichen Medien nicht wiederherstellbar sind.

Verweise

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT et al. Verwendung von Cefoperazon-MacConkey-Agar zur selektiven Isolierung von Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839 & ndash; 41.
2. MacConkey-Agar. Wikipedia, die freie Enzyklopädie. 4. April 2018, 18:16 UTC. 29. Dezember 2018, 15:22 Uhr en.wikipedia.org
3. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiologische Diagnose. 12 ed. Argentinien. Editorial Panamericana SA
4. Koneman E., Allen S., Janda W., Schreckenberger P., Winn W. (2004). Mikrobiologische Diagnose. (5. Aufl.). Argentinien, Editorial Panamericana SA
5. Cortez J., Ruiz Y., Medina L., Valbuena O. Wirkung von mit Meerwasser hergestellten Kulturmedien auf Gesundheitsindikatoren in Meeresgewässern von Spas in Chichiriviche, Bundesstaat Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P., Paredes F., Fernández del Barrio M. (1994). Praktische klinische Mikrobiologie. Universität Cadiz, 2. Auflage. UCA Publications Service.