NÄHRAGAR: BEGRÜNDUNG, VORBEREITUNG UND VERWENDUNG - BIOLOGIE - 2025

Der Nähragar ist ein nicht selektives Medium und keine unterschiedliche feste Kultur. In diesem Medium wachsen alle Arten von Bakterien, die aus ernährungsphysiologischer Sicht keine hohen Anforderungen stellen.

Es ist ein einfaches Medium und enthält trotz seines Namens einen niedrigeren Nährwert als andere ähnliche Medien wie Brain Heart Infusion Agar oder Trypticase Soy Agar.

Koloniezahl auf Nähragar

Seine Nützlichkeit im Labor ist sehr vielfältig. Es wird hauptsächlich zur Subkultur von Arten, zur Aufrechterhaltung von Stämmen, zur Zählung von Kolonien und als Grundlage für die Herstellung von Blutagar verwendet.

Ebenso kann aufgrund seiner hellbeigen Farbe die Produktion von Pigmenten, die von einigen Bakterienstämmen erzeugt werden, außergewöhnlich unterschieden werden, wie das grünliche Pigment von Pseudomonas aeruginosa, das von Serratia marcescens bei Raumtemperatur produzierte ziegelrote Pigment, das goldgelbe Pigment von Staphylococcus aureus unter anderem.

Darüber hinaus ist es eines der billigsten Wachstumsmedien auf dem Markt.

Basis

Wie bereits oben erwähnt, ist es ein sehr einfaches Medium, das auf der Bereitstellung von Nährstoffen für das Bakterienwachstum ohne Einschränkung und ohne komplexe zu interpretierende Reaktionen beruht.

Da das Medium durchscheinend ist, ist es ideal zum Zählen von Kolonien nach der Tiefensaatmethode.

Komposition

Es besteht hauptsächlich aus Fleischextrakt oder Hefeextrakt, Peptonen oder Gelatine-Pankreas-Digest, Agar-Agar, Natriumchlorid und destilliertem Wasser.

Der Fleisch- oder Hefeextrakt und die Peptonen stellen die wesentlichen Kohlenstoff- und Mineralstoffquellen (Stickstoff, Phosphor und Schwefel) dar, die von Bakterien als Energie- und Wachstumsquelle genutzt werden.

Ebenso ist Agar-Agar die Basis aller festen Kulturmedien und ersetzt Gelatine, die die erste Basenverbindung war, die von Robert Koch verwendet wurde, um seinen Medien eine feste Konsistenz zu verleihen.

Agar ist ein Polysaccharid aus Galactose, Galactomannan, Agarose und Agaropektin. Es setzt auf 40 ° C ein und schmilzt nahe 100 ° C.

Natriumchlorid seinerseits verleiht dem Medium die für die Bakterienentwicklung notwendige Osmolarität.

Schließlich dient das Wasser dazu, die lyophilisierten Verbindungen zu hydratisieren und aufzulösen. Es sollte destilliertes Wasser verwendet werden, das auf einen neutralen pH-Wert eingestellt ist. Leitungswasser sollte nicht verwendet werden, da es Calcium und Magnesium enthält, die mit Phosphaten im Medium reagieren und unlösliche Salze bilden können.

Vorbereitung

Für einen Liter Nähragar müssen 31 g des dehydrierten Mediums gewogen werden. In einen Kolben geben und in einem Liter destilliertem Wasser auflösen. Nach 5 Minuten Stehenlassen über einer Wärmequelle erhitzen und konstant mischen, bis 1 oder 2 Minuten gekocht wird.

Vorbereitung des Kulturmediums.

Der Kolben wird dann in einen Autoklaven gegeben und 20 Minuten bei 121ºC sterilisiert.

Sterilisation im Autoklaven

Am Ende der Zeit wird es aus dem Autoklaven entfernt und in sterilen Petrischalen unter Verwendung einer Laminar-Flow-Haube oder des Bunsenbrenners serviert.

Wenn die Petrischalen wegwerfbar sind (Kunststoff), muss das Medium verteilt werden, wenn der Agar eine Temperatur von ungefähr 50 ° C hat, um zu verhindern, dass sie durch übermäßige Hitze verformt werden.

Erstarren lassen und auf einem umgedrehten Plattenhalter lagern und bis zur Verwendung bei 2-8 ° C kühlen.

Die Platten müssen vor dem Aussäen temperiert werden. Nähragarplatten sollten nicht verwendet werden, wenn sie kontaminiert oder dehydriert sind.

Der pH-Wert des hergestellten Mediums muss auf 7,3 ± 0,2 eingestellt werden.

Anwendungen

Es ist das einfachste Kulturmedium, das im mikrobiologischen Labor verwendet wird. Seine Formulierung eignet sich hervorragend für das Wachstum nicht anspruchsvoller Bakterien.

Die Hauptverwendungen werden nachfolgend erläutert:

Als Grundlage für die Herstellung von Blutagar

Dieses Medium wird manchmal als Base zur Herstellung von Blutagar verwendet, ist jedoch nicht die am häufigsten verwendete Base.

Stimulieren Sie die Sporulation sporenbildender Bakterien

Dieses Kulturmedium ist besonders nützlich zur Stimulierung der Sporulation von sporenbildenden Bakterien wie Bacillus sp.

Hierzu wird ein Stamm der Gattung Bacillus ausgesät und 24 Stunden bei 37 ° C in Aerobiose inkubiert. Sobald die Kolonien gewachsen sind, wird die Platte einer Temperaturbelastung ausgesetzt, dh die Temperatur des Ofens wird auf 44 ° C erhöht und weitere 24 Stunden stehen gelassen oder 24 Stunden in einen Kühlschrank gestellt.

Am Ende der Zeit werden Abstriche der Kultur gemacht und mit Gram-Färbung oder mit Shaeffer-Fulton-Sporenfärbung gefärbt. In ihnen werden die Bazillen mit Endosporen (Sporen innerhalb des Bazillus) und Exosporen (Sporen außerhalb des Bazillus) beobachtet.

Dehnungswartung

Einige Forschungslabors oder Universitätslabors zur Unterstützung der Lehre verlangen, dass lebensfähige Bakterien von klinischer Bedeutung so lange wie möglich erhalten bleiben, um die Bakterienbank (Bacterioteca) für Forschungsarbeiten oder zur Vorbereitung von Lehrpraktiken zu nutzen, wenn die Die Schüler lernen, diese Mikroorganismen zu manipulieren und zu identifizieren.

Zu diesem Zweck können sowohl Nähragar als auch Hirnherzinfusionsagar verwendet werden. Der Agar wird hergestellt, in Röhrchen mit einem Bakelitdeckel gegossen und auf einer Basis so gekippt, dass sich der Agar verfestigt und einen Block am Boden und eine Abschrägung auf der Oberfläche bildet (Flötenschnabel).

Jedes Röhrchen ist mit dem Namen der zu säenden Bakterien und dem Datum gekennzeichnet. Jedes der Bakterien wird auf die Lünette ausgesät und 24 Stunden lang inkubiert. Sobald die Kolonien gewachsen sind, werden die Röhrchen bei Raumtemperatur gelagert.

Die Bakterioteca muss von 1 bis 3 Monaten erneuert werden, um eine Kontamination und Dehydrierung des Mediums sowie den Tod von Bakterien zu vermeiden.

Auf diese Weise können nur nicht wählerische Bakterien erhalten werden.

Kolonienzahl

Obwohl es spezielle Mittel zum Zählen von Kolonien gibt, wie beispielsweise Standardzählagar, kann Nähragar für diesen Zweck verwendet werden, entweder durch Oberflächenaussaat mit einem Drigalski-Spatel oder durch Tiefe. Aus diesem Grund ist es sehr nützlich bei der mikrobiologischen Analyse von Lebensmitteln und Wasser.

Diagnosetests ausführen

Da es sich um ein Medium handelt, das weder Blut noch andere Zusatzstoffe enthält, ist es ideal, um auf diesem Medium gezüchtete Kolonien zur Durchführung des Katalasetests zu nehmen.

Ebenso ist es aufgrund seiner hellen Farbe angezeigt, Oxidasetests direkt an einem Bereich des ausgesäten Agars ohne Störung durchzuführen.

Rückgewinnung von mesophilen Aeroben aus Salzwasser (Strände)

Der mit 10% Meerwasser hergestellte Nähragar ist nützlich für die Bewertung von mesophilen Aeroben in Strandgewässern.

Auf diese Weise kann der tatsächliche Grad der Kontamination des Wassers mit diesen Mikroorganismen erkannt werden, da bei dieser Art von Proben die Ergebnisse überlappen, wenn auf herkömmliche Weise hergestellte Kulturmedien verwendet werden.

Dies wurde von Cortez et al. im Jahr 2013 in einer Forschungsarbeit.

Dies kann durch die abrupte Veränderung erklärt werden, die Bakterien erfahren, wenn sie von einer hypersalzenen Umgebung in eine salzarme Umgebung übergehen. Daher geraten die Mikroorganismen in einen Zustand der Lethargie, in dem sie lebensfähig, aber nicht kultivierbar sind.

Verweise

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