CARY BLAIR MEDIUM: BEGRÜNDUNG, VORBEREITUNG UND VERWENDUNG - BIOLOGIE - 2025

Der durchschnittliche Cary Blair ist ein halbfester Agar, der zum Transport und zur Konservierung von biologischen Proben verwendet wird, die Darmpathogene, Mikroorganismen und anaerobe Labile enthalten. Wie bei allen Transportmitteln besteht seine Funktion darin, die Probe bis zur Kultivierung unter optimalen Bedingungen zu halten. Die vorhandenen pathogenen Mikroorganismen sowie die dazugehörigen Mikrobiota müssen lebensfähig bleiben, ohne jedoch ihre Population zu erhöhen.

Cary Blair Medium ist das Ergebnis der Formulierungsänderung von Stuart Transport Medium. Die Modifikation wurde 1964 durchgeführt und bestand darin, das pH-Regelsystem (Glycerophosphat) durch einen phosphatierten anorganischen Puffer zu ersetzen.

A. Kultur mit Cary Blair Medium B. Stuhlsammler mit Cary Blair Medium. Quelle: A. Video Meganhow, erhalten Sie eine Wundkultur 2011 youtube.com B. Benutzer: Mattes

Die Neuformulierung war notwendig, weil seine Schöpfer erkannten, dass Glycerophosphat nach einer bestimmten Zeit von einigen saprophytischen Bakterien metabolisiert werden konnte. Diese überlappen mehrfach die vorhandenen Krankheitserreger.

Andere Änderungen waren die Eliminierung von Methylenblau sowie eine Neueinstellung des pH-Werts in Richtung Alkalität (pH 8,4). All diese Änderungen verbesserten die Effizienz der Transportmittel.

Ursprünglich wurde das Cary Blair-Medium zur Aufrechterhaltung von Darmpathogenen wie Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae und Campylobacter sp. Verwendet.

In der Folge wurde jedoch die Wirksamkeit bei der Erhaltung der Lebensfähigkeit anspruchsvoller und labiler Krankheitserreger wie Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae und einiger Anaerobier beobachtet.

Basis

Cary Blair Medium enthält Natriumchlorid, Natriumthioglycollat, Dinatriumphosphat, Calciumchlorid und Agar.

Natriumchlorid hält das osmotische Gleichgewicht des Mediums aufrecht, Dinatriumphosphat und Calciumchlorid gleichen den pH-Wert aus. Natriumthioglykolat seinerseits behält ein geringes Oxidations-Reduktions-Potential bei, während der kleine Teil des Agars die halbfeste Konsistenz liefert.

Das Cary Blair-Medium enthält keine Nährstoffe, da die Funktion eines Transportmediums darin besteht, die Probe zu halten, ohne dass sich die Feuchtigkeit und die mikrobielle Belastung ändern. das heißt, es vermeidet die Dehydratisierung der Probe, während die Lebensfähigkeit und die Menge der vorhandenen Mikroorganismen erhalten bleiben.

Schließlich verhindert der leicht alkalische pH-Wert den Tod von Mikroorganismen durch Säuregehalt, insbesondere Vibrios sind sehr säureempfindlich.

Vorbereitung

Cary Blair Medium ist im Handel als spezielles gebrauchsfertiges Gerät erhältlich. Das Transportsystem wird von einem Plastikbeutel zum Peel Pack abgedeckt. Im Inneren befindet sich ein Tupfer zum Sammeln der Probe und das Behälterrohr für Cary Blairs halbfestes Medium.

Auch auf dem Markt gibt es Handelshäuser, die das dehydrierte Medium für die Herstellung im Labor liefern.

Wiegen Sie dazu 13,2 g des dehydrierten Mediums und lösen Sie es in einem Liter destilliertem Wasser auf. Das Präparat erhitzen und schütteln, bis es vollständig aufgelöst ist. Verteilen Sie das Medium in Reagenzgläsern mit Schraubverschluss (Bakelit).

Die Röhrchen 15 Minuten lang dämpfen. Abkühlen lassen und bis zur Verwendung bei Raumtemperatur aufbewahren.

Nicht inokuliertes Cary Blair-Medium kann bis zu 18 Monate bei Raumtemperatur optimal gelagert werden.

Der pH-Wert des Mediums muss auf 8,4 ± 0,2 eingestellt werden. Die Farbe des vorbereiteten Mediums ist beige mit einer gewissen Opaleszenz.

Verwenden

Art der Proben

Cary Blair Medium wird verwendet, wenn Stuhl-, Rektaltupfer- und Vaginalabstrichproben nicht sofort verarbeitet werden können.

Wenn kein Transportmittel verfügbar ist, können die Proben bei -70 ° C gelagert werden.

Probenahme

Der Tupfer wird mit der Probe imprägniert und in das Cary Blair-Medium eingeführt, ohne den Boden zu erreichen.

Identifizierung der Probe

Das Cary Blair-Medium muss über ein Etikett verfügen, auf dem die Basisdaten platziert sind, z. B. Vor- und Nachname des Patienten, Identifikationsnummer der Probe, Quelle der Probenentnahme, behandelnder Arzt, Datum und Uhrzeit der Entnahme. Probe, vermutliche Diagnose, Antibiotikabehandlung.

Transfer

Bei Stuhlproben dicht abgedeckt und bei Raumtemperatur transportiert. Für vaginale Proben auf der Suche nach anaeroben Mikroorganismen wird empfohlen, die Proben bei 4 ° C zu transportieren.

In allen Fällen beträgt die empfohlene Übertragungszeit 4-6 Stunden mit maximal 24 Stunden.

Wenn in Stuhlproben das Vorhandensein von Campylobacter jejuni vermutet wird und diese nicht innerhalb von 24 Stunden verarbeitet werden können, wird eine Lagerung in Cary Blair-Medium bei 4 ° C empfohlen.

Untersuchungen am Transportmittel Cary Blair

Mehrere Studien haben gezeigt, dass Cary Blair-Medium für enteropathogene Mikroorganismen der Gattungen Shigella und Salmonella bis zu 49 Tage nach Entnahme der Probe lebensfähig bleiben kann.

Vibrio cholerae, ein weiterer wichtiger Darmpathogen, kann 22 Tage überleben, während Yersinia pestis (Erreger der Beulen- und Lungenpest) nach 75 Tagen wieder gesund werden kann.

Trotz der nachgewiesenen Haltbarkeit im Hinblick auf die Rückgewinnung dieser Mikroorganismen wird empfohlen, die entnommenen Proben im Cary Blair-Medium so schnell wie möglich zum Labor zu transportieren.

Ebenso muss die Probe, sobald sie das Labor erreicht, unverzüglich in das jeweilige Kulturmedium ausgesät werden.

Andererseits wird das Cary Blair-Medium nicht nur für den Transport fakultativer Mikroorganismen nützlich, sondern auch für Proben empfohlen, die anaerobe Krankheitserreger enthalten.

In diesem Sinne führten DeMarco et al. 2017 eine Studie mit dem Titel: Überleben von vaginalen Mikroorganismen in drei im Handel erhältlichen Transportsystemen durch.

Sie zeigten, dass Cary Blair Transport Medium das beste Transportmedium für die Konservierung und Gewinnung von vaginalen anaeroben Mikroorganismen ist. Ebenso zeigten sie, dass die höchste Wiederfindungsrate erreicht wurde, wenn die Übertragungstemperatur 4 ° C betrug.

Daher wird der Schluss gezogen, dass die Transporttemperatur für Vaginalabstriche (anaerobe Mikroorganismen) bei 4 ° C liegen sollte. Während für Stuhlproben auf der Suche nach fakultativen Mikroorganismen die ideale Temperatur die Raumtemperatur ist.

QA

Um die Qualitätskontrolle des Cary Blair-Transportmediums zu bewerten, wurden Stämme, bekannt als Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae und Campylobacter sp.

Das Medium wird mit dem gewählten Stamm beimpft und 24 Stunden bei Raumtemperatur gehalten. Sie werden dann in die entsprechenden Kulturmedien gesät. In allen Fällen wird eine zufriedenstellende Rückgewinnung des betreffenden Mikroorganismus erwartet.

Verweise

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN et al. Überleben von vaginalen Mikroorganismen in drei im Handel erhältlichen Transportsystemen. Anaerobe. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Vergleich der Konservierungsmedien zur Lagerung von Stuhlproben. J Clin Microbiol. Neunzenhundertfünfundneunzig; 33 (8): 2176–2178.
3. Dan M., Richardson J., MD Miliotis, Koornhof HJ. Vergleich von Konservierungsmedien und Gefrierbedingungen für die Lagerung von Kotproben. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E., Allen S., Janda W., Schreckenberger P., Winn W. (2004). Mikrobiologische Diagnose. 5. Aufl. Editorial Panamericana SA Argentinien.
5. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiologische Diagnose. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentinien.
6. Conda Pronadisa Laboratories. Halber Cary Blair. Verfügbar unter: condalab.com
7. Metrix Labor. Cary Blair. Verfügbar unter: metrixlab.mx