IMMERSIONSÖL: ZUSAMMENSETZUNG, EIGENSCHAFTEN, VERWENDUNG - BIOLOGIE - 2025

Das Immersionsöl ist eine viskose klare Flüssigkeit mit einem hohen Brechungsindex. Aus diesem Grund wird es häufig bei mikroskopischen Beobachtungen verwendet, da es die Eigenschaft bietet, Licht zu konzentrieren, wenn es das 100-fache Objektiv des Mikroskops passiert, wodurch sein Auflösungsvermögen erhöht wird.

Dies liegt daran, dass zwischen dem Objektiv und dem Abstrich ein viskoser Film gebildet wird, der verhindert, dass die Lichtstrahlen streuen, wenn sie die Luft erreichen, wodurch die Lichtstrahlen auf die Probe konzentriert werden.

Tropfer mit Ölimmersion und Mikroskop mit 100-fachem Objektiv unter Verwendung von Ölimmersion fokussiert. Quelle: Pixabay.com

Immersionsöl wird nur mit dem 100X-Objektiv verwendet. Aus diesem Grund wird das 100X-Objektiv auch als Immersionsobjektiv bezeichnet. Der Rest ist als trockene Ziele bekannt. Diese Linse kann ohne das Immersionsöl nicht verwendet werden, da ohne sie die Visualisierung nicht zufriedenstellend wäre.

Die Hauptfunktion von Immersionsöl besteht darin, klarere, schärfere und klarere Bilder zu liefern, die die Beobachtung von Details ermöglichen, die mit anderen Objektiven nicht möglich wären.

Das erste Öl, das für diesen Zweck verwendet wurde, war Anisöl, das zusammen mit der ersten von Giovanni Battista Amici hergestellten Tauchlinse verwendet wurde. Dies verhinderte nur eine chromatische Aberration, erhöhte jedoch nicht die numerische Apertur des Linsensystems.

Dann wurde Zedernöl verwendet, aber es hatte viele Nachteile, die seine Nichtbenutzung erzwangen. Unter ihnen war sein hoher Säuregehalt, der die Ziele kurzfristig beschädigte.

Anschließend wurden andere Substanzen wie Wasser und Glycerin verwendet, bis synthetische Immersionsöle erzeugt wurden, die nach und nach raffiniert wurden, bis sie das aktuelle Immersionsöl erreichten, das eine komplexe Verbindung organischer Substanzen ist.

Zusammensetzung des Immersionsöls

Das Immersionsöl besteht aus einer Mischung organischer Verbindungen wie Terphenyl, hydriertem Terphenyl, natürlichen Kohlenwasserstoffen und Polybutenen.

Immersionsöleigenschaften

Immersionsöl ist eine hellgelbe Flüssigkeit mit leicht viskosem Aussehen, einem charakteristischen Geruch und einer Dichte zwischen 0,92 und 0,99 g / cm ³ .

Immersionsöl ist nicht wasserlöslich und hat einen Siedepunkt von 340 ° C. Der Brechungsindex a (n 20 ° C / D): reicht von 1,482 bis 1,516. Inzwischen beträgt der Flash-Index 110 ° C und die Viskosität reicht von 100 bis 120 mPa.s.

Dieses Produkt muss ordnungsgemäß entsorgt werden, da es ökotoxisch ist. Mit anderen Worten, es ist umweltschädlich und betrifft hauptsächlich Wassertiere. Andererseits reizt es die Haut und die Schleimhäute. Bei Verschlucken ist es nephrotoxisch und kardiotoxisch.

Immersionsöl ist bei 15 bis 25 ° C stabil, der Temperatur, bei der es gelagert werden muss.

Grundlagen des Immersionsöls

Bei Verwendung von Linsen mit höherer Vergrößerung sollte die Intensität des Lichts erhöht werden. Viele der Lichtstrahlen gehen jedoch verloren, weil sie beim Erreichen der Luft (Raum zwischen Deckglas und Linse) gestreut werden und sogar einige Strahlen vollständig reflektiert werden.

Immersionsöl hat einen glasähnlichen Brechungsindex. Wenn das Öl zwischen der 100X-Linse und dem Deckglas in Kontakt kommt, werden daher die Lichtstrahlen konzentriert.

Die konzentrierten Strahlen passieren die Probe und schärfen das Bild, dh erhöhen die numerische Apertur des Objektivs und korrigieren chromatische und sphärische Aberrationen.

Verwendungen oder Anwendungen

Die Verwendung von Immersionsöl ist insbesondere dann erforderlich, wenn ein Bild breiter betrachtet werden muss, wobei das Objektiv mit der höchsten Vergrößerung (100-fach Objektiv) verwendet wird, um Details zu erkennen, die für die Erstellung einer Diagnose erforderlich sind.

Daher ist es in mikroskopischen Studien in verschiedenen Bereichen wie Histologie, Zytologie, Hämatologie und Bakteriologie weit verbreitet. Zum Beispiel ist es nützlich, um die Eigenschaften von Zellen und Geweben eines Patienten zu untersuchen.

Es wird auch zur Analyse von Blutausstrichen verwendet, bei denen die Eigenschaften von Hämoparasiten innerhalb und außerhalb der Erythrozyten sowie in Gram-Präparaten detailliert beschrieben werden sollen, um die morphotintoriellen Eigenschaften der Mikroorganismen zu definieren.

Es wird im Allgemeinen in festen Zubereitungen verwendet, da es in frischen Zubereitungen nicht empfohlen wird. Dies liegt daran, dass die Oberflächenspannung des Öls bewirkt, dass sich das Deckglas bewegt, wodurch sich die Probe während der Beobachtung verschiebt und eine Analyse verhindert.

Andererseits ist Immersionsöl nicht nur in der herkömmlichen Lichtmikroskopie nützlich, sondern wird auch in TIRFM-Mikroskopen (Total Internal Reflection Fluorescence) und in konfokalen Fluoreszenzanwendungen verwendet.

Schritte zum Beobachten einer Zubereitung mit Immersionsöl

Um einen Objektträger unter einem Mikroskop zu betrachten, sollte der Objektträger zuerst mit dem Objektiv mit der geringsten Vergrößerung, normalerweise dem 10-fachen, mit geringer Lichtintensität fokussiert werden.

Dann geht es zum 40X-Objektiv und der Lichtweg wird leicht erhöht. Einige Analysen können bei dieser Vergrößerung durchgeführt werden, jedoch ist eine 100-fache Vergrößerung erforderlich, um strukturelle Details zu erkennen.

Bevor Sie zum 100X-Objektiv wechseln, wird ein Tropfen Immersionsöl genau dort auf das Deckglas gegeben, wo Sie es beobachten möchten. Anschließend wird der Mikroskoprevolver bewegt, um das 100x-Objektiv in der Präparation zu lokalisieren.

Die Intensität des Lichts wird reguliert (erhöht) (durch Bewegen des Kondensators und Öffnen der Blende). Dann sollten einige kleine Bewegungen der Mikrometerschraube (vorwärts oder rückwärts) perfekt fokussieren, wenn das Mikroskop parafokale Objektive verwendet.

Wenn Sie versuchen, das Präparat direkt mit der Immersionslinse zu fokussieren, haben Sie möglicherweise Probleme, den Fokus zu finden. Es ist keine unmögliche Aktion, aber die Schwierigkeit steigt erheblich.

Pflege

Um das Immersionsöl verwenden zu können, müssen bestimmte Bedingungen berücksichtigt werden.

Wenn eine farbige Zubereitung hergestellt wurde, z. B. ein mit Giemsa oder einem Gramm gefärbter Abstrich, warten Sie, bis der Abstrich vollständig getrocknet ist, bevor Sie das Öl eintauchen. Andernfalls bildet das Öl zusammen mit dem Wasser Mizellen, die die Zubereitung nicht sichtbar machen.

Andererseits sollte das 100X-Objektiv nach Beobachtung der Zubereitungscharge, dh am Ende des Arbeitstages, sorgfältig mit einem Linsenpapier mit Ethanol gereinigt werden. Wenn die Linse verschmutzt bleibt, trocknet das Öl darauf und es ist sehr schwierig, sie zu entfernen, wodurch das Sichtfeld beschädigt wird.

Ebenso ist zu berücksichtigen, dass das Öl brennbar ist und von Wärmequellen (Feuerzeugen) ferngehalten werden muss. Es ist wichtig, eine Erwärmung über 65 ° C zu vermeiden.

Schließlich ist Öl ein giftiges Produkt. Daher sollte ein direkter Kontakt mit Haut und Schleimhäuten vermieden werden, da dies zu leichten Reizungen führen kann. Um Unfälle zu vermeiden, wird empfohlen, Handschuhe und eine Schutzbrille zu verwenden.

Bei Kontakt mit dem Öl sollte der Bereich mit viel Wasser gewaschen werden. Wenn das Öl in die Augen spritzt, sollte es auf die gleiche Weise gewaschen werden, wobei die Augen offen bleiben. Bei versehentlicher Einnahme ist es wichtig, warmes Wasser einzunehmen und Erbrechen auszulösen, zusätzlich zum nächsten Arzt.

Verweise

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